I vetrini per microscopio vengono utilizzati per esaminare gli organismi unicellulari e per osservare da vicino piccole piante e organismi. Esistono due tipi di vetrini preparati: supporti a secco e supporti a umido. Ciascun tipo di metodo di preparazione viene utilizzato per il montaggio di diversi tipi di cellule. Se stai montando a umido un campione particolarmente pallido o traslucido, potrebbe essere necessario colorare il campione in modo che sia visibile al microscopio.
Passi
Metodo 1 di 3: preparazione di una montatura a secco
Passaggio 1. Selezionare una diapositiva pulita
Tieni un vetrino vicino a una fonte di luce e guarda attraverso per assicurarti che sia privo di macchie e sporco. La maggior parte dei vetrini per microscopio sono piatti in alto e in basso e di forma rettangolare. Sono chiari, consentendo alla luce del microscopio di passare e illuminare il campione traslucido. Se il vetrino è sporco o macchiato, non sarai in grado di esaminare efficacemente il tuo campione.
Se scopri che il vetrino del tuo microscopio ha qualche contaminazione, comprese le tue impronte digitali, lavalo rapidamente con acqua e sapone liquido. Asciugare il vetrino con un panno pulito. Non utilizzare fazzoletti di carta o fazzoletti di carta, poiché possono lasciare pelucchi
Passaggio 2. Ispezionare il campione per determinare se è necessario affettarlo
Il campione deve essere da traslucido (o semitrasparente) a trasparente per consentire il passaggio della luce. Se la luce non può passare completamente attraverso il campione e nell'oculare del microscopio, non sarai in grado di vedere il campione attraverso il microscopio.
Alcuni degli esemplari (ad esempio, una ciocca di capelli o un'ala di insetto) sono sottili e traslucidi da soli e non avranno bisogno di essere tagliati con una lametta
Passaggio 3. Tagliare un pezzo sottile del campione
Usa una lama di rasoio per tagliare il materiale del campione in una fetta sottile e traslucida. I supporti a secco sono i più semplici da preparare poiché non utilizzano alcun liquido tra il vetrino e il campione. Un supporto a secco è ideale per l'ispezione di campioni che non sono a rischio di essiccazione. I materiali che sono comunemente montati a secco includono:
- Sughero o legno di balsa.
- Petali o foglie di fiori.
- Zampe o ali di insetti.
- Capelli, pelliccia o piume.
Passaggio 4. Posizionare il campione sul vetrino
Usa un paio di pinze per raccogliere la fetta sottile del tuo campione. Adagialo delicatamente su un lato dello scivolo. Se si utilizza un vetrino concavo (in cui un lato si abbassa), posizionare il campione al centro dell'area concava.
- Montare il campione su un vetrino concavo se si teme che il campione possa rotolare o scivolare fuori dal vetrino piatto. Ad esempio, usa uno scivolo concavo se stai preparando un petalo di fiore arricciato che rotola da una parte o dall'altra.
- Per tutti gli altri tipi di campioni, andrà bene un vetrino piatto.
Passaggio 5. Posizionare un vetrino coprioggetto sul campione
Il vetrino coprioggetto impedisce al campione di cadere dal vetrino. Lo scivolo proteggerà anche il campione nel caso in cui uno degli utenti del microscopio abbassi accidentalmente l'obiettivo così tanto da toccare il campione.
- I vetrini coprioggetto sono pezzi molto sottili e trasparenti di vetro o, più comunemente, di plastica. Ogni slittamento è di circa 3⁄4 pollici (1,9 cm) sia in larghezza che in lunghezza.
- Il vetrino preparato è ora pronto per essere ispezionato al microscopio.
Metodo 2 di 3: Preparazione di una montatura bagnata
Passaggio 1. Metti 1 goccia d'acqua sul vetrino
Usa un contagocce per far cadere 1 goccia d'acqua sul centro esatto di un vetrino piatto o concavo. Questa goccia d'acqua è ciò che dà il nome alla montatura bagnata. Il liquido mantiene umido il campione e impedisce che i campioni organici bagnati si secchino e distorcano la loro forma. L'acqua conserva anche esemplari viventi, come gli organismi unicellulari.
Se desideri creare una diapositiva permanente utilizzando materiale organico morto, puoi utilizzare uno strato sottile di smalto trasparente invece di una goccia d'acqua
Passaggio 2. Raschiare o affettare una sezione del campione umido
I campioni utilizzati per il montaggio a umido sono in genere materiale organico umido o vivo. Usa una lametta o uno stuzzicadenti per tagliare o raschiare una piccola quantità di campione bagnato. I materiali comunemente usati per realizzare diapositive per montaggio a umido includono:
- Cellule della guancia o placca dentale (raschiata dalla bocca con uno stuzzicadenti).
- Una sottile sezione trasversale di un gambo di pianta (tagliata con una lametta).
- Se stai studiando organismi unicellulari, ad esempio un'ameba o una pinzetta di paramecio non serviranno a molto. Usa invece un contagocce pulito per raccogliere un paio di gocce dell'acqua in cui nuotano gli organismi unicellulari o le alghe.
Passaggio 3. Posizionare il campione nella goccia d'acqua
A seconda del tipo di materiale che stai utilizzando come campione, usa un paio di pinze, pinzette o uno stuzzicadenti per trasferire il campione sul vetrino. Posiziona il campione al centro della tua goccia d'acqua, in modo che sia sospeso nel liquido.
Se stai usando un contagocce per raccogliere organismi unicellulari, metti 1 o 2 gocce nella goccia d'acqua già sul vetrino
Passaggio 4. Posizionare un vetrino coprioggetto sopra il campione bagnato
Tenere il vetrino coprioggetto con un angolo di 45°. Posiziona uno dei bordi verso il basso proprio accanto al campione sulla goccia d'acqua. Quindi abbassare l'altro lato del vetrino finché non è piatto sopra il campione. Dovresti vedere le gocce d'acqua sparse sotto il vetrino coprioggetto fino a raggiungere i bordi.
Non toccare o premere sul vetrino coprioggetto una volta che è in posizione. Se lo fai, rischi di schiacciare il campione e l'acqua dal vetrino
Metodo 3 di 3: colorazione di campioni cellulari
Passaggio 1. Posizionare un foglio di carta assorbente contro un bordo del vetrino coprioggetto
Appoggia l'asciugamano contro il bordo del vetrino senza disturbare il materiale sotto il vetrino coprioggetto. Il tovagliolo di carta assorbente estrarrà parte dell'acqua da sotto il vetrino coprioggetto e tirerà l'agente macchiante sotto il vetrino coprioggetto e sul campione.
- Se il campione su vetrino montato a umido è pallido o incolore (ad esempio una sezione trasversale di uno stelo di pianta incolore), potrebbe essere difficile da vedere quando si guarda al microscopio. La colorazione del campione ti consentirà di vederne meglio la forma e la consistenza.
- Questo di solito viene fatto dopo aver già esaminato il campione umido in un vetrino senza colorarlo. Il vetrino può essere già preparato, anche se non è colorato.
Passaggio 2. Mettere 1 goccia di iodio o blu di metilene sull'altro lato del vetrino coprioggetto
Utilizzare un contagocce e rilasciare la sostanza chimica colorante sopra il vetrino da microscopio, direttamente accanto al vetrino coprioggetto. Fare attenzione a erogare solo 1 goccia. L'agente colorante in eccesso potrebbe fuoriuscire dal vetrino.
- Lo iodio o il blu di metilene possono essere acquistati in qualsiasi negozio di formazione o negozio di forniture per la biologia.
- Un modo alternativo per farlo è aggiungere la goccia di agente colorante all'acqua su un vetrino montato a umido quando lo si prepara per la prima volta. In questo caso, non è necessario un tovagliolo di carta.
Passaggio 3. Attendere che l'agente colorante venga aspirato sotto il coperchio del vetrino
L'agente macchiante comincerà a filtrare sotto il vetrino coprioggetto mentre il tovagliolo di carta estrae l'acqua dall'altro lato. Possono essere necessari fino a 5 minuti prima che lo iodio o il blu di metilene si impregnino completamente sotto il coperchio del vetrino e saturano il campione.
Una volta che lo iodio o il blu di metilene si sono ritirati completamente sotto il coperchio del vetrino, il campione è completamente tinto
Passaggio 4. Eliminare l'agente macchiante in eccesso con un tovagliolo di carta pulito
Pulire la superficie del vetrino in modo che non fuoriescano liquidi sciolti dal lato. Il vetrino montato a umido è ora colorato e pronto per l'osservazione al microscopio.
